胰岛素抗体

基本信息

专科分类： 生长发育检查
检查分类： 免疫检查
适用性别： 男女均适用
是否空腹： 　非空腹
手术参考价： 45元
科　室： 生长发育检查

胰岛素抗体检查简介

胰岛素抗体的出现有两种情况，一种出现于接受外源性胰岛素治疗的病人，主要和胰岛素制剂的纯度有关系，一种出现于从未接受胰岛素治疗的病人，称为胰岛素自身抗体。

胰岛素抗体检查过程

（1）酶联免疫吸附法

将胰岛素-卵清蛋白用包被液稀释至20μg/ml，包被聚苯乙烯反应板微孔，每孔100μl，4℃过夜。洗涤液洗3次，每次3min，用pH7.4，0.01mol/LPBS（内含15%小牛血清）封闭，43℃1h。同上法洗后加待测血清（1∶100）或阴性、阳性对照，每孔100μl，43℃1h（37℃2h）。同上法洗后加最适稀释度的HRP-SPA，每孔100μl，45℃1h（37℃2h）。同上法洗后加底物（OPD-H2O2）溶液，每孔100μl，37℃10min显色。用2mol/LH4SO4终止反应。

酶联免疫检测仪检测492nm波长吸光度值。

（2）免疫酶斑点法

将NC膜划成5mm×5mm的小方格，浸于pH7.4，0.01mol/LPBS中30min，滤纸吸干。取2μl胰岛素-卵清蛋白交联物点样于小方格中央，室温自然干燥。用pH7.4，0.01mol/LPBS（内含卵清蛋白10.0g/L）封闭，45℃1h，滤纸吸干。加待测血清2μl于抗原包被处，45℃30min后，用pH7.4，0.01mol/LPBS洗3次，每次3min，滤纸吸干。将膜置于最适浓度HRP-SPA中，45℃30min，同上法洗后滤纸吸干。浸于新配底物中5～10min，显色后流水冲洗，终止反应。

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