细菌的鉴定

基本信息

专科分类： 消化
检查分类： 生化检查
适用性别： 男女均适用
是否空腹： 　非空腹
手术参考价： 20元
科　室： 消化

细菌的鉴定检查简介

细菌的鉴定是对细菌进行各方面的检查。例如：细菌对于碳水化合物的代谢试验、吲哚试验、淀粉的水解等各种试验。

细菌的鉴定检查过程

一.吲哚试验

方法：以接种环接种待试细菌的新鲜斜面培养物于邓亨氏蛋白胨溶液中，37℃培养24～48小时后(可延长4～5天)。于培养液中加入戊醇或二甲苯2～3ml，摇匀，静置片刻后，沿试管壁加入试剂2毫升。在戊醇或二甲苯下面的液体变红色者为阳性反应。

也可将一指头大的脱脂棉，滴上两滴欧立希氏试剂，再在同处加滴两滴高硫酸钾(K2S2O4)饱和水溶液，置于含培养液的被检试管中，离液面约半寸，置烧杯内水浴煮沸为止，脱脂棉上出现红色为阳性。此法略繁，但省试剂且准确，因为将试剂加到液体中，吲哚和粪臭素均呈阳性，而用此法，只是吲哚(它能挥发)呈阳性反应。

亦可以滤纸片浸湿1%的二甲基苯丙烯甲醛的10%浓HCl溶液，然后以接种环刮取一环琼脂的纯培养物涂布于该滤纸上。

细菌涂印周围呈蓝色者为阳性，细菌涂印周围无色泽变化或淡黄色者为阴性。

二.淀粉的水解

淀粉在酸的催化作用下，能发生水解;淀粉的水解过程：先生成分子量较小的糊精(淀粉不完全水解的产物)，糊精继续水解生成麦芽糖，最终水解产物是葡萄糖。

对剂：碘化钾2g蒸馏水300ml

培养基：将细菌接种在平板上，置37度温箱中培养24h，加革兰氏碘液于菌落上，观察颜色变化，呈蓝色者为阴性，无蓝色为阳性。

三.β-半乳糖苷酶试验

试剂：0.75MONPG溶液：取80mg溶于15ml蒸馏水中，在加入缓冲液(6.9gNaH2P04溶于45ml蒸馏水中，用30%NaOH调整pH为7.0，再加水至50ml)5ml，置4℃冰箱中保存。

方法：取纯菌落用无菌生理盐水制成浓的菌悬液，加入0.25mlONPG液，置35℃水浴20min至3h，观察结果。

结果判定：通常在20～30min内显色。出现黄色为阳性反应。

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