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痰液分泌型IgE

痰液分泌型IgE注意事项

ELISA中的主要试剂成份如抗原、抗体、酶结合物、底物等,如制备不当或保存不妥,均易变质失活。ELISA的步骤多,操作如不合规范,难于得到准确的结果。因此为保证检测的有效性,每次试验必须进行质量控制。优良的试剂盒中提供的阳性对照和阴性对照一般可作为试验的质控品,按其说明操作,从所得的吸光度值可以判断试验的有效性。以临床检验中最常用的HBsAg检测为例,试剂盒中的阴性对照应为HBsAg阴性的人血清,阳性对照应标明HBsAg含量(例如9±2ng/ml)。每批试验应同时作3份阴性对照和二份阳性对照。阴性对照测定所得吸光度值应小于某一数值(例如0.100),而阳性对照吸光度均值减去阴性对照吸光度均值应大于某一数值(例如0.200)。这些数值为该试剂盒在规定的测定条件下,特定的实验值。因此如测定结果符合要求,既表明所用试剂的有效性,又表明操作的正确性,只有在这种情况下,该批试验方为有效。

有的试剂盒中所含阳性对照和阴性对照不符合作为质控品的要求,或实验室的测定条件如比色计等,与试剂盒说明中的不同,则应根据实际情况采用合适的质控品和从实验得出的本实验室的质控值。商品的质控血清价格昂贵。定性测定ELISA的质控品一般可自行制备。仍以HBsAg检测为例。阴性对照可取自用高质量试剂检测为HBsAg阴性的献血员。阳性对照的制备可在阴性对照血清中加入适量的HBsAg阳性血清,将此混合血清与参照标准品或定量质控品作对比测定,标定其HBsAg含量。然后进行适当的稀释,得到所需浓度的HBsAg阳性血清,再加入适量抗菌防腐剂如庆大霉素和柳硫汞后,分装低温冻存。

痰液分泌型IgE不宜人群

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