三级甲等综合医院国营
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主要分五项检查:
一、细胞总数
1、直接计数法适用于脑脊液标本比较清亮或微混。用滴管吸取已混匀的脑脊液标本少许,直接滴入细胞计数板,充入计数池内,静置2~3分钟,低倍镜下计数两个池内的四角和中央大格共10个大格内的细胞数,即为1μl脑脊液中的细胞总数(红、白细胞总数)。在书写报告时,再换算成每升脑脊液中的细胞总数。
2、稀释计数法适用于如果脑脊液的细胞过多、混浊或带血的脑脊液。可用血红蛋白毛细吸管吸取混匀的脑脊液20μl,加入有红细胞稀释液0.38μl的小试管中,混匀后滴入计数池内,用低倍镜计数4个大方格的细胞总数,乘以50,即为每微升脑脊液的细胞总数,最后换算成每升脑脊液的细胞总数报告。
二、白细胞计数
1、直接计数:非血性标本,用吸管吸取冰乙酸后全部吹出,使管壁仅附着少许冰乙酸,然后用同一吸管吸取少量混匀的脑脊液标本,数分钟后红细胞就会完全溶解,再滴入计数池内,按上法计数。
2、稀释计数:如白细胞过多,可用白细胞稀释液稀释后,按上法计数,注意计数结果应乘以稀释倍数。
3、血性标本的校正计数:混有血液的脑脊液标本混匀后,用1%的冰乙酸溶液稀释后仍按上法计数。为了剔除因出血而带来的白细胞,可用下式进行校正。每微升CSF内白细胞校正数=每微升CSF未校正的白细胞数-
三、白细胞分类计数
1、直接分类法:在白细胞直接计数后,转高倍镜观察,依据细胞形状和细胞核的形态进行分类,共计数白细胞和内皮细胞100个,分别计算单个核细胞和中性粒细胞所占的比例,以百分数表示。如白细胞总数不足100个,则直接写出单个核细胞和中性粒细胞的具体数字。如白细胞总数在30以下,可不做直接分类计数或改用染色分类计数。
2、染色分类法:脑脊液标本离心,取沉淀涂片,制成均匀薄膜,置室温或37℃孵箱中,干燥后以瑞氏染色,油镜下进行分类计数。以百分比表示之。
四、病原体形态学检查
1、细菌临床怀疑流行性脑脊髓膜炎或化脓性脑脊髓膜炎时,应做细菌学涂片检查。操作如下:
(1)脑脊液标本2~3ml,以3000rpm离心15分钟,去上清液,将沉淀物涂在洁净玻璃片上,共制片2张,涂片自然或在37℃温箱中干燥固定,且勿用火焰固定。
(2)涂片固定后,一张用亚甲蓝染色,另一张用革兰氏染色。
(3)革兰氏染色涂片用于检查肺炎双球菌、流感杆菌、葡萄球菌、绿脓杆菌、链球菌、大肠杆菌等,亚甲蓝染色用于检查脑膜炎双球菌。如找到细菌,则按其染色性质及形态报告。
(4)如怀疑结核性脑膜炎,可将脑脊液标本静置24小时,取其液面薄膜涂片,置37℃温箱中干燥固定,作抗酸染色,油镜下找抗酸杆菌。
(5)采集标本时应注意污染。显微镜观察时应注意细胞内外的细菌形态,报告时应予以描述。
2、真菌检查—新型隐球菌的检查
(1)取脑脊液标本,以2000rpm离心10分钟,沉淀物涂片,加经过过滤的优质细墨汁一滴,混合后加盖玻片显微镜下检查。
(2)先用低倍镜观察,如发现在黑色背景下有圆形透光小点,中间有一细胞大小的圆形物质,即转用高倍镜仔细观察其结构,新型隐球菌直径5~20μm,可见明显的厚夹膜,周围有较强的折光,并有出芽的球形孢子。
(3)发现上述特征,即可报告墨汁涂片找到“隐球菌属”。并须进一步作真菌培养。
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